病毒包装技术服务
目的基因不能直接整合到大多数真核细胞,常用的手段是将目的基因包装成病毒来感染细胞,从而得到表达满足实验需求。病毒有很多种,常见的有慢病毒和腺病毒。
服务描述:
慢病毒(Lentivirus)是逆转录病毒的一种。构建的siRNA / miRNA 慢病毒载体,与化学合成的 siRNA 和基于瞬时表达载体构建的普通siRNA 载体相比,一方面可以扩增替代瞬时表达载体使用, 另一方面,Lentivirus-siRNA 克隆经过慢病毒包装系统包装后,可用于感染依靠传统转染试剂难于转染的细胞系如原代细胞、悬浮细胞和处于非分裂状态的细胞,并且在感染后可以整合到受感染细胞的基因组,进行长时间的稳定表达。
慢病毒包装简要流程:
1) 含有目的基因的慢病毒RNAi 干扰载体的构建和质粒纯化提取。
2) 慢病毒载体和慢病毒质粒共转染293T细胞。
3) 培养48hrs - 72hrs 左右,收集含有病毒的上清培养液。
4) 病毒的纯化和浓缩。
5) 分装、- 80 ℃ 保存。
6) 滴度测定目的基因检定,并出具检测报告
本中心提供shRNA表达载体,miRNA 表达载体,shRNA慢病毒载体包装,miRNA 慢病毒载体包装,稳定表达shRNA细胞系,稳定表达miRNA细胞系等技术服务。
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